Водородные связи и флуоресценция

Флуоресценция молекул в конденсированных средах и растворах в значительной степени определяется не только их электронной структурой, но и характером межмолекулярных взаимодействий. Среди них особое место занимают водородные связи, способные тонко и глубоко изменять спектральные, кинетические и фотохимические свойства флуорофоров.


Водородная связь представляет собой направленное межмолекулярное или внутримолекулярное взаимодействие между атомом водорода, ковалентно связанным с электроотрицательным атомом (O, N, F, реже S), и другим электроотрицательным атомом, обладающим неподелённой электронной парой. В контексте флуоресцентной химии ключевое значение имеют:

  • межмолекулярные водородные связи между флуорофором и молекулами растворителя;
  • внутримолекулярные водородные связи, стабилизирующие определённые конформации и электронные состояния;
  • динамические водородные сети в протонных средах.

Энергия водородной связи сопоставима с тепловой энергией при комнатной температуре, что делает её чувствительной к возбуждению молекулы и переходу между электронными состояниями.


Влияние водородных связей на электронные состояния флуорофоров

Электронное возбуждение флуорофора сопровождается перераспределением электронной плотности, что непосредственно влияет на способность молекулы быть донором или акцептором водородной связи. В результате:

  • изменяется относительная стабилизация основного (S₀) и возбуждённого (S₁) состояний;
  • происходит сдвиг энергии электронного перехода;
  • варьируется вероятность радиационных и безызлучательных процессов.

Спектральные сдвиги

Водородное связывание часто приводит к батохромным (красным) сдвигам полос поглощения и флуоресценции, если возбуждённое состояние сильнее стабилизируется за счёт усиления донорно-акцепторных свойств. В ряде случаев наблюдаются гипсохромные сдвиги, особенно при ослаблении π-сопряжения или изменении планарности молекулы.


Водородные связи и квантовый выход флуоресценции

Квантовый выход флуоресценции определяется соотношением скоростей радиационных и безызлучательных процессов. Водородные связи могут влиять на него противоположными способами:

Повышение квантового выхода возможно при:

  • фиксации жёсткой конформации молекулы;
  • подавлении внутренних вращений и колебательных релаксаций;
  • стабилизации флуоресцентного возбуждённого состояния.

Понижение квантового выхода наблюдается при:

  • усилении внутренней конверсии за счёт колебательной релаксации;
  • активации фотоиндуцированного переноса протона;
  • формировании нерадиационных комплексов с растворителем.

Фотоиндуцированный перенос протона (ESIPT)

Одним из наиболее ярких проявлений роли водородных связей является перенос протона в возбуждённом состоянии (Excited State Intramolecular Proton Transfer, ESIPT).

Механизм ESIPT

В молекулах, содержащих донорную и акцепторную группы, соединённые внутримолекулярной водородной связью, возбуждение приводит к резкому изменению кислотно-основных свойств:

  • донор протона становится более кислотным;
  • акцептор — более основным;
  • протон быстро (фемто–пикосекунды) переносится по водородной связи.

В результате формируется таутомер в возбуждённом состоянии, обладающий собственной флуоресценцией, часто сильно сдвинутой в красную область.

Спектральные особенности

Для ESIPT-систем характерны:

  • двойная флуоресценция (нормальная и таутомерная);
  • большой стоксов сдвиг;
  • высокая чувствительность к растворителю и температуре.

Роль растворителя и протонных сред

Растворитель, способный образовывать водородные связи, становится активным участником фотопроцессов. В протонных растворителях (вода, спирты, амиды):

  • формируются сольватные оболочки вокруг флуорофора;
  • возникает динамическое переориентирование водородных связей;
  • наблюдается сольватохромия флуоресценции.

Динамическая сольватация

После электронного возбуждения происходит релаксация растворителя, связанная с перестройкой водородных связей. Это приводит к:

  • временному сдвигу максимума флуоресценции;
  • уширению спектральных полос;
  • зависимости спектров от временного разрешения измерений.

Внутримолекулярные водородные связи и конформационная стабильность

Внутримолекулярная водородная связь часто выступает как структурный элемент, фиксирующий планарность или определённую геометрию флуорофора. Это особенно важно для ароматических и гетероциклических систем.

Эффекты включают:

  • уменьшение некогерентных колебательных степеней свободы;
  • повышение жёсткости хромофорного скелета;
  • увеличение времени жизни возбуждённого состояния.

Такие свойства активно используются при создании высокоэффективных органических люминофоров и флуоресцентных меток.


Тушение флуоресценции, связанное с водородными связями

Водородные связи могут выступать фактором динамического и статического тушения флуоресценции.

Динамическое тушение

Связано с:

  • коллизионным взаимодействием с протонными молекулами;
  • ускорением внутренней конверсии;
  • переносом энергии или электрона через водородную связь.

Статическое тушение

Происходит при образовании нефлуоресцентных комплексов в основном состоянии, стабилизированных водородными связями.


Биологически релевантные аспекты

В биомолекулах и биологических средах водородные связи играют доминирующую роль. Флуоресценция аминокислот, коферментов и флуоресцентных белков определяется сложной сетью водородных взаимодействий:

  • между хромофором и белковой матрицей;
  • с молекулами воды;
  • между функциональными группами внутри макромолекулы.

Изменение водородных связей при денатурации, связывании лиганда или изменении pH немедленно отражается в флуоресцентных характеристиках, что делает их мощным аналитическим инструментом.


Методологические аспекты изучения

Исследование роли водородных связей во флуоресценции требует сочетания методов:

  • стационарная и временно-разрешённая флуоресцентная спектроскопия;
  • ИК- и Раман-спектроскопия для анализа водородных связей;
  • изотопное замещение (H/D);
  • квантово-химическое моделирование возбуждённых состояний.

Совокупность этих подходов позволяет связать спектральные наблюдения с микроскопической картиной межмолекулярных взаимодействий.


Водородные связи выступают универсальным регулятором флуоресцентных свойств, соединяя электронную структуру молекулы с её окружением. Их влияние охватывает весь спектр фотопроцессов — от сдвига спектров до переноса протона и тушения излучения, формируя фундаментальные основы флуоресцентной химии в сложных средах.