Высокоэффективная тонкослойная хроматография (ВЭТХ) представляет собой усовершенствованный метод разделения компонентов смеси на основе их распределения между неподвижной фазой и подвижным растворителем. ВЭТХ отличается высокой разрешающей способностью, быстротой анализа и возможностью количественного определения компонентов.
Неподвижная фаза в ВЭТХ состоит из тонкого слоя сорбента с однородной зернистостью и высокой поверхностной площадью. Наиболее распространены модифицированные силикагельные пластины с частицами размером 5–10 мкм. Однородность размера частиц обеспечивает равномерное движение фронта растворителя, минимизируя зонное растекание и повышая эффективность разделения. Для специфических задач используются фазовые модификации, например, силикагель с C18-группами для обратнопропорционального хроматографирования.
Выбор подвижной фазы определяется полярностью компонентов смеси и типом сорбента. Для нормальной фазовой ВЭТХ применяются неполярные или умеренно полярные органические растворители, тогда как для обратнопропорциональной хроматографии используют водные или водно-органические системы. Оптимальная комбинация растворителей обеспечивает максимальную раздельную способность и предотвращает слипание зон.
Разделение в ВЭТХ основано на различиях адсорбции компонентов на поверхности сорбента и их растворимости в подвижной фазе. Основные механизмы включают:
Для достижения высокой эффективности важна точность нанесения проб. Обычно используют микрокапельные аппликаторы, нанося пробу в виде узкой линии или точек толщиной 0,1–0,5 мм. Концентрация и объём пробы должны быть оптимизированы, чтобы избежать смазывания зон и перекрытия сигналов.
Хроматограмму развивают в камерах с закрытой атмосферой насыщенного парами растворителя, что минимизирует испарение и поддерживает стабильную скорость фронта. Контроль температуры и влажности обеспечивает воспроизводимость результатов. Скорость фронта растворителя и время развития определяются составом смеси и свойствами сорбента.
После развития пластины компоненты визуализируются различными способами:
Для количественного анализа применяются densitometry и сканирующие системы, регистрирующие интенсивность зон и позволяющие строить калибровочные кривые.
Разрешающая способность ВЭТХ зависит от:
Использование мелкозернистых пластин и автоматизированных систем нанесения и детектирования позволяет достигать разрешения, сопоставимого с жидкостной хроматографией высокого давления.
ВЭТХ широко применяется для:
Метод отличается низкой стоимостью, простотой эксплуатации и возможностью быстрого скрининга большого числа образцов.
Современные системы ВЭТХ включают автоматические аппараты для нанесения проб, программируемые камеры для развития и цифровые детекторы. Это повышает точность, уменьшает вариативность и расширяет спектр аналитических задач. Автоматизация позволяет проводить многокомпонентный анализ с высокой воспроизводимостью и минимальной ручной работой.